原标题
《五子衍宗丸对小鼠记忆力、免疫功能、耐缺氧及耐疲劳的影响》
作者
金龙，葛争艳，刘建勋
[摘要]
目的：观察五子衍宗丸对小鼠记忆力、免疫功能、耐缺氧及耐疲劳的影响。
方法：选用ICR雄性小鼠，五子衍宗丸高、中、低剂量分别按生药计为2.4，1.2，0.6g/kg，ig给药。以Morris水迷宫测定小鼠记忆力和认知能力；碳粒廓清率、迟发型变态反应测定免疫功能；常压缺氧和常温游泳法测定耐缺氧和耐疲劳能力。
结果：与对照组比较，五子衍宗丸各剂量组小鼠寻找隐藏平台的逃避潜伏期及总路程明显缩短(P<0.05或P<0.01)；高剂量组廓清指数K值明显增加(P<0.01)；各剂量组耳肿胀度无明显差异；高、中剂量组耐缺氧时间明显延长(P<0.01)；高剂量组常温游泳时间有所延长(P<0.05)
结论：五子衍宗丸具有明显增强小鼠记忆力和空间认知力，提高小鼠耐缺氧、抗疲劳能力的作用；同时可提高非特异性免疫功能，但对细胞免疫功能无明显作用。
五子衍宗丸是中医补肾益精传统名方，由枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子5味中药组成。临床上主要用于治疗肾虚腰痛，遗精早泄，阳痿不育等男性性功能疾病，疗效卓著。近年来有文献报道从中医补肾生髓益智的理论出发，将该药用于健忘、轻度认知障碍的干预上疗效明显，并能提高机体免疫功能和抗应激能力等。本文对其进行相关药效学研究。
材料
1.1 药物 20080909，北京同仁堂股份有限公司科学研究所提供；男宝胶囊，0.3g/粒，批号1001074，山西康威制药有限责任公司生产；盐酸左旋咪唑片，批号060719，山东省莒南制药厂生产。
1.2 仪器 Morris水迷宫实验系统(中国医学科学院药物研究所)，由圆形水池、图像自动采集和处理系统组成。紫外分光光度计 SHMADZU UV-120-02(日本产)；电子天平DENVER INSTRUMENT(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。
1.3 试剂 炭黑墨汁(生物染色)，批号20081128，国药集团化学试剂有限公司生产；2，4-二硝基氟苯(DNFB)，批号080702，中国医药(集团)上海化学试剂公司生产；丙酮，批号20081017，北京世纪红星化工有限责任公司生产；橄榄油，批号F20080219，国药集团化学试剂有限公司生产；钠石灰，批号20080315，上海五四化学试剂有限公司生产。
1.4 动物 选用ICR雄性小鼠，体重18～22g，动物合格证号SCXK(京)2007-0001；由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。在中国中医科学院西苑医院实验动物中心饲养，二级动物饲养设施，合格证号SYXK(京)2009-0001。室温22～25℃，相对湿度45%～60%。
方法
2.1 对小鼠记忆力的影响 将小鼠随机分为5组，10只/组。即：正常对照组、男宝组(0.5g/kg) 、五子衍宗丸高、中、低剂量组(2.4，1.2，0.6g生药/kg)。(五子衍宗丸临床用量按生药计为9.47g/人，按70kg/人计算为0.135g/kg，小鼠等效剂量为1.23g/kg)。所有动物ig给药，正常对照组ig等体积蒸馏水。1次/d，连续2周，训练4d后进行水迷路实验(训练期间继续ig给药)。第5天药后1h，进行水迷宫定位航行实验。通过观察和记录小鼠寻找并爬上平台的路线图及所需时间，分析和推断小鼠的学习、记忆和空间认知等方面的能力。Morris水迷宫图像自动采集和处理系统能自动地采集动物的入水位置、游泳的速度、搜索目标的所需时间、运行轨迹和搜索策略等参数，并可对所采集的各种数据进行统计和分析。
2.2 对小鼠非特异性免疫功能的影响 将实验小鼠随机分为6组，左旋咪唑组(25mg/kg)，其他组别同实验2.1。各组按剂量连续ig给药，正常对照组ig等体积蒸馏水。1次/d，连续给药1周。末次给药后1h，尾静脉注射10%炭黑墨汁(0.2mL/只)。分别于2min和10min，从眼眶静脉取血20μL，加入4mL蒸馏水中摇匀。用分光光度计在600nm下比色，测吸收度(A)，计算廓清指数K值。
2.3 对DNFB诱导小鼠迟发型变态反应的影响 将实验小鼠随机分为7组，模型组，左旋咪唑组(25mg/kg)，其他组别同实验2.1。各组按剂量ig给药，1日/次，连续给药3d后，除正常对照组外，每鼠腹部电推去毛，范围约2cm×2cm大小。将新鲜配制的1%DNFB溶液50μL均匀涂抹于小鼠腹部(致敏)。致敏后第5天，将新鲜配制的1%DNFB溶液20μL均匀涂抹于各组小鼠右耳两面(攻击)。在致敏和攻击期间各组继续ig给药，24h后，颈椎脱臼处死小鼠剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm的耳片称质量。左右耳片质量之差为肿胀度(FPR) 。
2.4 对小鼠耐缺氧能力的影响 实验分组、给药剂量同实验2.1。各组按剂量ig给药，1次/d，连续1周。末次药后1h，将小鼠迅速放入装有钠石灰 (10g/瓶) 的250mL广口瓶中，用凡士林密封瓶盖，秒表记录小鼠缺氧死亡时间。
2.5 对小鼠耐疲劳能力的影响 实验分组、给药剂量同实验2.1。各组按剂量ig给药，1次/d，连续1周。末次给药后1h，将小鼠迅速放入常温水中(水深20㎝)，用秒表计算自小鼠落水至溺死所需时间。
2.6 统计学处理 所有实验数据均以X的算数平均值±s表示，采用SPSS 11.5 for Windows软件进行方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。
结果
3.1 对小鼠记忆力的影响 实验数据见表1。
经过4d的训练，五子衍宗丸各剂量组及男宝组小鼠寻找并爬上平台所需时间及总路程明显缩短，与正常对照组比较具有非常显著性差异(P<0.05或0.01);但小鼠游泳的速度各组间无明显差异。
3.2 对小鼠非特异性免疫功能的影响 实验数据见表2。
五子衍宗丸高剂量组廓清指数 K 值明显增加，与正常对照组比较具有非常显著性差异(P<0.01)。
3.3 对 DNFB 诱导小鼠迟发型变态反应的影响 实验数据见表3。
实验小鼠各组耳肿胀度明显增加，与正常对照组比较具有极显著性差异 (P<0.001)，说明造模成功；左旋咪唑组肿胀度明显增加与模型组比较具有显著性差异(P<0.05)，五子衍宗丸各剂量组及男宝组与模型组比较无明显差异，且保持在正常水平上。
3.4 对小鼠耐缺氧能力的影响 实验数据见表4。
五子衍宗丸高、中剂量组及男宝组与正常对照组比较，耐缺氧时间明显延长(P<0.05或0.01)。
3.5 对小鼠耐疲劳能力的影响 实验数据见表5。
五子衍宗丸高剂量组及男宝组与对照组比较，常温游泳时间有所延长，具有显著性差异(P<0.05) 。
讨论
中医认为“肾为先天之本，生命之根”、“肾主智”，肾虚髓空是智不足之根本。人体的正常生长、发育、衰老与肾密切相关，肾中精气决定着人的生、老、病、死等生命活动的条件。近年来有实验及临床研究报导，肾虚者多记忆力下降，神经递质含量及受体数量下降。中医又有“正气存内，邪不可干。邪之所凑，其气必虚”的论述，指出“正气”与机体对疾病抵抗力的内在联系，所以，中医“虚证 ”与免疫功能有关；抗应激作用是机体处于各种不利的内外环境条件下所进行的一系列反应。补肾壮阳药多能增强机体对各种有害刺激的抵抗能力，纠正脑内神经递质含量的改变，使机体在恶劣条件下延长生存时间、提高生存率。
五子衍宗丸是传统的中医古方，始载于唐《悬解录》，一直传承至今。本研究结果表明：五子衍宗丸具有增强小鼠记忆力和空间认知力的作用，可增强非特异性免疫功能;耐缺氧和常温游泳时间明显延长。提示五子衍宗丸具有增强记忆力和免疫功能，以及耐缺氧、抗疲劳等作用，为该药在临床上的应用进一步提供实验依据。
［参考文献］
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本文内容转自《中国实验方剂学杂志VOL16.NO.16》，内容仅供分享交流之用，如涉侵权请留言告知，我们会及时处理。
