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分子生物学第二部分

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第十五章 RNA生物合成

1.DNA指导的RNA聚合酶、RNA聚合酶以四种核苷三磷酸(NTP)为前体或称原料(要求记清四种核苷三磷酸,特别记住Mg+)、起始核苷酸一般为嘌呤核苷三磷酸、RNA链的生长方向、核心酶(α2ββ’)σ因子的功能(P349-350)

2.真核细胞中有三种RNA聚合酶,每种均含有两个大亚基和4-8个小亚基(P350)

  (1)RNA聚合酶I:核仁中,合成5.8S rRNA、18S rRNA和28S Rrna

  (2)RNA聚合酶Ⅱ:核质中,合成mRNA以及snRNA

  (3)RNA聚合酶Ⅲ:核质中,合成tRNA和5S RNA

3.RNA指导的RNA聚合酶(RDRP)、依赖RNA的RNA聚合酶(复制酶)(P350)

4.原核生物启动子:有3个功能部位,其中后两项为启动子的核心区域(P351)

  (1)起始转录部位转录第一个核苷酸的碱基对(+1)

  (2)RNA聚合酶识别位点(-35):Sextama框,TTGACA序列,很大程度上决定了启动子的强度,RNA聚合酶对强启动子识别较好,对弱启动子识别较差,细胞可以通过调节单位时间内所转录的mRNA分子数,从而控制蛋白质的合成速度。

  (3)结合位点(-10):Pribnow框,TATAAT或TATPuAT序列

5.真核生物启动子:RNA聚合酶I只转录rRNA,只有一种启动子类型;RNA聚合酶Ⅱ转录mRNA;RNA聚合酶Ⅲ转录tRNA和5S rRNA(P352)

6.真核生物RNA聚合酶Ⅱ:主要有四个部位,前三个部位是大多数启动子都具备的(p352)

  (1)帽子位点:起始位点(+1),碱基大多为 A

  (2)TATA框:又称Hogness框或Goldberg-Hogness框,在TATA框的两侧倾向于富含G·C碱基对的序列,这是TATA框发挥作用的重要因素之一,TATA框一般位于-25附近,其决定了转录的起始点的选择。

  (3)CAAT框:一般位于-75附近,控制转录起始的频率

  (4)增强子:又称为远上游序列,指能使和它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。增强子大多为重复序列,其内部常有一个核心序列TGG(A/T)(A/T)(A/T),该序列是产生增强效应所必须的。

7.转录过程要求看懂(P352),终止子(两类、不同点)、发卡式结构(P354)

8.加工修饰(6种)、原核细胞的mRNA通常没有转录后的加工过程、原核细胞的rRNA必须经历剪切(16S、23S和5S)和修饰的加工过程、原核细胞tRNA的加工方式也是剪切和修饰(P355)

9.内含子外显子、核内不均一RNA(hnRNA)、由hnRNA转变为mRNA的加工修饰过程(P355-358)

10.操纵子学说(重点,常考,整个部分都要完全理解)(P361-364)

11.转录调控(P365)

   (1)顺式作用元件:位于基因的5’上游区、3’下游区或基因内部,启动子、增强子、沉默子

   (2)反式作用因子:转录因子分为三类

       a.螺旋-转角-螺旋(HTH)蛋白:识别螺旋

       b.亮氨酸拉链蛋白:亮氨酸总是有规律地每隔6个氨基酸就出现一次,且分布于螺旋的同一侧,每绕两周出现一次、拉链状结构

       c.锌指蛋白:真核生物中最大的一类DNA结合蛋白,锌以4个配位键和4个半胱氨酸(或2个半胱氨酸和2个组氨酸)相结合,每隔“指”含12-13个氨基酸

12.基因的选择性表达主要是通过反式作用因子(转录因子)、顺式作用元件和RNA聚合酶三者间相互作用而实现。(P367)

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