乙型病毒性肝炎，简称乙肝，是一种由乙型肝炎病毒（HBV）引起的，以肝脏为主要损害器官的疾病，其可以通过血液、母婴垂直传播、密切接触和性传播感染他人，是世界上最常见的传染病之一，也是我国当前流行性最广泛、危害性最严重的一种疾病。由于缺乏特异性抗乙型肝炎病毒的治疗药物，乙肝病毒感染引发的慢性乙型肝炎仍然严重威胁着人类健康。在临床上能够应用的只有抗病毒药物和乙肝免疫球蛋白（HBIg），主要用于阻断母婴传播、移植手术、高危人群被动免疫和预防输血感染。
但是由于乙肝免疫球蛋白是血液制品，其供应只能来自于人体，存在资源稀缺性，我国长期处于特异性免疫球蛋白紧缺状态，而且用于血液制品生产的血浆只能由血制品企业控制的单采血浆站（简称“浆站”）采集。在血制品行业历史上，无论是国内还是国外，都出现过多次严重事故，因此这一行业受到相关政策和法律的严格限制，行业壁垒较高。乙肝免疫球蛋白的临床使用价格受相关政策的限制，导致很多血液制品企业在高成产，低利润的情况下，经常由于价格成本倒挂而导致厂商不得不停止乙肝免疫球蛋白的生产，所以经常出现“一针难求”的现象。尽管血液制品提取工艺成熟，全世界主要血液制品生产企业的工艺均类似，但由于来源于不同的人群，不同地区甚至不同生产企业，所以不同批次之间的乙肝免疫球蛋白产品从成分到有效效价存在很大差异，质量很难得到保证。另外由于乙肝免疫球蛋白是来源于志愿者或者感染恢复期病人、是一种高风险的产品，由于“窗口期”的存在，这类产品存在传播艾滋病、乙肝、丙肝等传染病的风险。
天然全人源乙肝病毒中和抗体，是指抗体来自于天然的人的抗原特异性B细胞所分泌的能够在体外中和HBV病毒的未加人工修饰的单克隆抗体。研发天然全人源抗体主要技术包括B细胞永生化技术、单个B细胞RT-PCR扩增抗体基因及单个B细胞测序等技术，这类技术是以从人身上分出来的B细胞为起始点，最后得到单个B细胞所表达的抗原特异性抗体。天然全人源单克隆抗体技术不仅序列100%是人的，而且是经过人体免疫耐受环境下经过选择、产生的成熟抗体，对自体没有副作用，称之为天然全人源抗体。以此开发的抗体药用于人类疾病治疗最大限度地降低了免疫原性的可能性。
图1. 天然全人源单克隆抗体技术平台（HitmAb@）技术路线图
珠海泰诺麦博生物技术有限公司，已经建立了天然全人源单克隆抗体技术平台（HitmAb@）（图1）。利用该技术平台从免疫乙肝疫苗的志愿者外周血单个核细胞（PBMC）中分离获得六株能识别乙肝病毒表面抗原（HBsAg）具有较高结合力的（EC50＜0.039µg/ml）抗乙肝病毒的天然全人源单克隆抗体。
对六株重组天然全人源乙肝单克隆抗体进行细胞中和试验，通过感染后对病毒DNA复制、乙肝病毒表面抗原分泌、乙肝病毒核心抗原分泌三项指标检测单抗对于HBV病毒感染HepG2-hNTCP细胞的中和效应，鉴定出四株（MAb2,MAb3, MAb4 and MAb6）单抗有很好的病毒中和作用（表1）, 其中MAb3 和MAb6中和效价最高（EC50<0.046ug/ml）。
表1. 天然全人源抗HBV单克隆抗体的中和效应
抗体 |
中和滴度（EC50）ug/ml |
||
试验1 |
试验2 |
平均值 |
|
MAb1 |
0.546 |
0.429 |
0.487 |
MAb2 |
0.098 |
0.071 |
0.085 |
MAb3 |
<0.046 |
<0.046 |
<0.046 |
MAb4 |
0.088 |
0.077 |
0.083 |
MAb5 |
>100 |
>100 |
>100 |
MAb6 |
<0.046 |
<0.046 |
<0.046 |
天然全人源HBV中和抗体主要优势：
1. 免疫原性低，安全性好
由于天然全人源HBV中和抗体，其序列100%是人的序列，而且是经过人体免疫耐受环境下经过选择、产生的成熟抗体，作为药物应用于人体，具有极低的免疫原性。天然全人源抗体在其研发的起跑线上，就极大地降低了研发和投资风险，大幅提升了成药率，在临床应用安全性高。
2. 中和滴度高
人免疫球蛋白是血液制品是混合物，而天然全人源HBV中和抗体是一种基因重组的单一大分子产物，中和效价高。如本文中提到的MAb3和MAb6抗体的50%病毒中和效价（EC50）达＜0.046µg/ml（很低浓度的抗体即能达到有效抑制病毒的作用），显示出很大的成药性潜力。
3. 质量可控
天然全人源HBV中和抗体药物，将利用GMP级别的大规模哺乳动物细胞表达，是在严格质量体系控制下进行规模化生产的标准化的生物工程产品，所有的生产流程都不依赖于动物制品，完全是细胞水平上的生产，因此其过程将完全杜绝因为依靠采血而产生的批次间差异。
4. 成本低
乙肝病毒免疫球蛋白是依靠血站采集的人的血液，生产成本昂贵。而重组天然全人源HBV中和抗体将完全是在基因和细胞水平上的操作，一旦形成规模化生产，其生产成本将极大地低于血液制品。天然全人源HBV中和抗体药物成本约为传统乙肝免疫球蛋白的1/5－1/10，每支天然全人源HBV中和抗体药物售价约为传统乙肝免疫球蛋白的1/2，每支天然全人源HBV中和抗体药物中和效价约为传统乙肝免疫球蛋白至少2-3倍。
天然全人源性抗乙肝病毒单克隆抗体相对于源于人血清的乙肝免疫球蛋白的多克隆抗体的混合物无疑是一个迭代性的进步，一旦投入市场，相比较目前市场上的传统乙肝免疫球蛋白产品而言，将产生代差级别的竞争优势，在安全性、抗病毒活性、生产工艺标准化、产品成本等方面将获得传统产品无法比拟的优势。天然全人源HBV抗体将有可能全面取代乙肝免疫球蛋白。
