岳亚文 韩 伟
华东理工大学中药现代化工程中心
上海 200237
摘 要：制备色谱技术是用于分离提取天然产物有效成分的一种重要技术。现简要综述了各类制备色谱技术的原理，介绍了各类制备色谱技术在天然产物提取分离中的应用情况。
关键词：制备色谱技术；应用；天然产物；原理
0 引言
制备色谱技术发展至今已有100多年历史，其目的在于分离制备一种或者多种纯组分[1]。从最早的常压柱色谱技术、薄层色谱技术，到后来发展起来的加压液相色谱技术、高速逆流色谱技术、模拟流动床色谱技术等，制备色谱技术已经成为现代科学研究和生产实践中分离多组分化合物的一个重要技术手段，尤其在自然界中天然产物活性成分的提取和纯化中起着重要作用。本文主要介绍几种重要的制备色谱技术的原理及其在天然产物分离纯化中的应用情况。
1 制备色谱技术的原理
1.1 薄层色谱
薄层色谱技术属于液相色谱技术的范畴，经典的制备型薄层色谱设备简单，投资较少，但处理量较小，通常用来分离毫克级的样品，且被分离的化合物需要从薄层板上刮下，并将其从吸附剂中提取出来。薄层色谱中常用的是硅胶吸附色谱，其次是氧化铝吸附薄层色谱。
1.2 常压柱色谱
常压柱色谱应用较为广泛，技术也相对成熟，主要包括吸附柱色谱、分配柱色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱、干柱色谱等。其中，吸附柱色谱中的硅胶吸附柱色谱是目前应用最为广泛的一种常压柱色谱。
吸附柱色谱的技术原理是不同化合物由于分子结构不同，与吸附剂表面作用力的大小也不同，同一种冲洗溶剂对不同分子结构的化合物溶解度不同，致使冲洗溶剂在冲洗时，不同化合物组分在色谱柱中的流动速度不同，从而将复杂混合物分离。
1.3 加压制备色谱
加压制备色谱技术是一种使用较为广泛的色谱分离纯化技术，它是将分离填料填装在色谱柱内，用液体流动相进行洗脱，利用药物中不同活性成分与填料相互作用力的差异来分离混合物。一般将压力0.2 MPa左右的称为快速色谱；压力低于0.5 MPa的称为低压制备色谱；压力在0.5～2 MPa的称为中压制备色谱；压力大于2 MPa的称为高压制备色谱，也叫高效液相色谱。制备型加压液相色谱分离的关键部位是色谱柱，色谱柱的大小取决于待分离样品量的多少。
快速色谱技术操作非常简便，常用于简单的物质分离。它与柱色谱类似，但比柱色谱多了一个加压装置，可缩短分离操作时间，填料颗粒较大，因此分辨率较低。快速色谱中使用最广泛的固定相是硅胶。
低压液相色谱（LPLC）比快速色谱稍微复杂点，填料颗粒较小一些，分辨率也稍高。低压制备色谱的加压手段一般有空气泵加压、双链球加压、氮气钢瓶加压、蠕动泵加压等。
中压制备色谱（MPLC）可承载更大的样品量，色谱柱也较长较大，需要的压力比低压液相色谱更大，同时它的分辨率也更高，分离时间更短。其工作原理是由恒流泵输送移动相，通过进样阀上样，在色谱柱对样品进行分离后，利用检测器检测，计算机记录、处理、打印数据，同时收集各个馏分。
高压液相色谱（HPLC）一般色谱柱较短，内径较大，填料颗粒更细，具有高柱效、高流速、高分离速度的特点，可制备纯化难分离的物质，通常作为分离纯化操作的最后一步。高效液相色谱的压力较大，普通玻璃柱易破裂，一般选用不锈钢材料做色谱柱[1-4]。
1.4 高速逆流色谱
高速逆流色谱（HSCCC）是逆流色谱中最具实用意义的一类，高速逆流色谱分离柱的固定相无载体，消除了载体对分离过程的影响，适合分离极性物质和具有生物活性的物质，且高速逆流色谱超载能力强，进样量大，尤其适用于制备性分离，同时具有高回收率。高速逆流色谱仪主要由恒流泵、进样阀、主机、检测器、色谱工作站和馏分收集器组成。
高速逆流色谱工作时，需要不互溶的两相液体，一种作为固定相，另一种作为流动相。它是根据单向性流体动力平衡原理分离不同物质的，在主机的线圈一端注入固定相，进样后，恒流泵压入流动相载着样品进入线圈，线圈高速转动，两相就有相对运动之势，恒流泵的单向阀使得固定相无法逆向流出，流动相却不断流入穿过固定相，样品就会在两相中无限次分配，最终由于样品组分分配系数不同而被分离。高速逆流色谱仪转速越快，固定相保留越多，分离效果就越好[5]。
1.5 模拟移动床色谱
模拟移动床色谱（SMB）技术首先应用于石油化学工业。通常的色谱分离技术存在间歇性生产、操作费用高等缺点，而模拟移动床色谱技术具有操作连续化、流动相耗量少等优点，因此该技术逐渐受到重视。与普通色谱技术相比，模拟移动床色谱技术具有操作自动化、制备效率高、制备量大等优点，常用来分离手性物质，但其设备复杂，使用和维护困难，优化提纯的条件也较为复杂，所得到的产品液的浓度低于进料液的浓度[6]，且模拟移动床色谱仪是一种二元分离器，应用范围较窄。
模拟移动床色谱仪的固定相不随床层移动，而是通过物料进出口随流动相流动方向移动，实现固定相与流动相的逆流。根据液流流速和所起作用的不同，把整个床层分为4个区域，Ⅰ区：吸附剂的再生区，Ⅱ区：B的解吸和A的吸附，Ⅲ区：A的吸附和B的解吸，Ⅳ区：洗脱液的再生区[7]。
1.6 超临界流体色谱
超临界流体色谱（SFC）是对气相色谱和高效液相色谱的补充，比高效液相色谱速度更快，溶剂更易除去，它以超临界流体为流动相，常用的超临界流体有CO2，其临界点性质温和，成本低，安全，且纯度高[8]。超临界流体具有气体黏度低、扩散系数大和液体溶解能力强的优点。超临界流体色谱技术的主要原理是根据待测物在固定相和流动相两相中的分配系数不同，继而实现对待测物的先后洗脱[9]。
2 制备色谱技术在天然产物提取分离中的应用
2.1 在黄酮类成分提取中的应用
2.1.1 分离淡豆豉中的大豆异黄酮
大豆异黄酮是黄酮类化合物，与雌激素结构相似，是由大豆成熟的种子和青蒿、桑叶等中药发酵而成的制品淡豆豉的主要活性成分之一。曲丽萍[10]等利用反相制备高效液相色谱技术（RP-HPLC），以乙腈-水-冰醋酸（35:65:1）为流动相，流速为3.0 mL/min，进样量为750 μL，从淡豆豉中分离得到大豆异黄酮、大豆黄素和染料木素纯品，产物纯度均达到99%以上。
2.1.2 分离高良姜黄酮中的高良姜素和山奈素
高良姜提取物提取自姜科山姜属植物高良姜，其主要活性成分为黄酮类化合物，主要包括高良姜素和山奈素，具有抗肿瘤、抗病毒、镇痛消炎等作用。侯洪瑞[11]等采用大孔吸附树脂和制备型高效液相色谱技术，从高良姜提取物中分离出高良姜素和山奈素，分离效果好，产品纯度高。制备型高效液相色谱的流动相为甲醇-0.6%乙酸水溶液（58:42），流速为7 mL/min，最终分离出的高良姜素纯度为99.55%，山奈素纯度为99.7%。
2.1.3 分离竹叶黄酮中的异荭草苷和荭草苷
荭草苷和异荭草苷是竹叶黄酮中黄酮类化合物的两种主要单体，具有抗氧化、抗炎等作用，其单体价格昂贵。许将[12]等建立了用制备型高效液相色谱技术分离竹叶黄酮中荭草苷和异荭草苷的方法，色谱流动相为甲醇-0.3%乙酸水溶液（32:68），流速为5 mL/min，所得异荭草苷纯度可达99%以上，荭草苷纯度在93%以上。
2.1.4 从甘草中提取黄酮类化合物
甘草是蝶形花亚科甘草属植物甘草的根或根茎，具有清热解毒等功能，黄酮类化合物是植物甘草的重要有效成分之一。Yunpeng Fan[13]等使用离线制备型二维正相液相色谱/反相液相色谱技术，从甘草中分离纯化黄酮类化合物，总共得到24种高纯度（纯度均在90%以上）黄酮类化合物。
王绍艳[14]等用模拟移动床色谱技术对甘草黄酮中的甘草苷和甘草素进行分离，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙醇-水（30:70）为流动相，在萃余液出口得到甘草苷，在萃取液出口得到甘草素，浓缩、重结晶后两种产品纯度均达到96%。
2.1.5 从黄芪中分离黄酮苷
黄芪是豆科黄芪属植物黄芪的根，黄芪中含有许多具有抗氧化作用的黄酮类化合物。Weihua Xiao[15]等利用高速逆流色谱技术对黄芪中的黄酮苷进行分离纯化，得到毛蕊-7-0-β-D葡糖苷、芒柄花苷等5种高纯度黄酮苷。
2.1.6 分离橘皮中的多甲基黄酮
橘皮中的黄酮类化合物具有抗癌、抗氧化等生理作用。李成平[16]等利用高速逆流色谱技术，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水（1:0.8:1:1.2）为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，从橘皮粗提物中分离出4种黄酮类化合物：5,6,7,8,3′,4′-六甲氧基黄酮、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮、5,6,7,8,4′-五甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黄酮，其纯度分别为98.9%、97.8%、99.2%、99.8%。
2.2 在苷类成分提取中的应用
2.2.1 从玄参中分离哈帕苷和桃叶珊瑚苷
哈帕苷和桃叶珊瑚苷是玄参中的主要活性成分环烯醚萜苷类化合物的主要成分。李静[17]等从鲜玄参根提取物中制得哈帕苷和桃叶珊瑚苷的混合物，利用高效液相色谱技术，以甲醇-水（4:96）为流动相，得到哈帕苷和桃叶珊瑚苷的单体，两者纯度均大于99%。
2.2.2 从朱砂根中分离朱砂根皂苷
朱砂根皂苷属于三萜皂苷，是朱砂根中的活性成分之一，具有抗癌活性和抗HIV活性。甄铧[18]采用C18色谱柱分离朱砂根皂苷，并用反相高效液相色谱技术，色谱流动相选择了甲醇-水，经过一次分离得到朱砂根皂苷单体，纯度为96.4%。
2.2.3 从人参花蕾和三七叶苷中分离人参皂苷
人参皂苷属于固醇类化合物。人参皂苷是人参花蕾中的主要活性成分，具有改善细胞代谢水平、增强机体功能的作用。人参花蕾中有两种主要的人参皂苷：原人参二醇型皂苷和原人参三醇型皂苷。王冠[19]等采用正相低压制备色谱技术，以正丁醇-乙酸乙酯-水（4:1:5）为流动相，流速为8 mL/min，将原人参二醇与原人参三醇分离，再采用制备型高效液相色谱技术纯化人参皂苷Re，纯度可高达98.5%。
三七是五加科植物三七的干燥根，具有镇痛、止血、抗心血管疾病等作用，人参皂苷Rb3是三七叶中的人参皂苷之一，具有镇静催眠的作用。韩金玉[20]等用大孔吸附树脂精制三七叶苷提取物，再以正丁醇-乙酸乙酯-水（2:1:1）为流动相，流速为40 mL/min，从三七叶苷精制物中分离出人参皂苷Rb3单体，纯度在95%以上。
2.2.4 从甜菊糖中分离莱鲍迪苷A和甜叶菊苷
甜菊糖提取自菊科草本植物甜叶菊，由甜菊苷、莱鲍迪苷A等许多不同的成分组成，是一种天然的甜味剂。张凌云[21]等采用中低压制备色谱技术，从甜菊糖结晶母液中分离出莱鲍迪苷A，以乙腈-水（80:20）为流动相，流速为4 mL/min，最终得到莱鲍迪苷A单体的纯度为90.22%。
孙大庆[22]等以甜叶菊苷提取液为原料，利用模拟移动床色谱技术分离甜叶菊苷，工艺参数为：切换时间12 min，进样质量浓度40 mg/mL，进料流速7.5 mL/min，此条件下得到的产品甜叶菊苷纯度为80.69%，收率为93.48%。
2.2.5 纯化何首乌活性成分二苯乙烯苷
二苯乙烯苷是何首乌的主要成分之一，是一种多羟基酚类化合物，具有心血管活性、免疫调节等作用，同时具有降血脂、抗衰老作用。汪维云[23]等利用反相高压液相制备色谱技术对何首乌提取液的精制液进行分离，以甲醇-水（40:60）作为流动相，分离出的二苯乙烯苷含量达到97%以上。
2.3 在酯类成分提取中的应用
2.3.1 从当归挥发油中分离纯化Z-藁本内酯
Z-藁本内酯是当归、川芎和藁本等药材中的主要活性成分。苗爱东[24]采用固相萃取预处理和高效液相色谱技术，以甲醇-水（70:30）为流动相，流速为8 mL/min，从当归的挥发油中分离出Z-藁本内酯，经质谱、核磁共振光谱、红外光谱、紫外光谱共同检测，确定其最高纯度可达到99.6%。
2.3.2 分离独活中的香豆素类成分
蛇床子素是中药独活中的主要活性成分香豆素类含量最多的一种，有抗肿瘤的作用。黄秀珍[25]等利用高速逆流色谱技术从独活提取物中分离制备高纯度的蛇床子素，选用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（1.5:2.5:2:1.5）为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，流速为3 mL/min，得到的蛇床子素纯度达到97.1%。
严志宏[26]等利用高速逆流色谱技术，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（1.5:2.5:2:1.5）为溶剂体系，从裂叶独活根中分离出二氢欧山芹醇乙酸酯、蛇床子素、二氢欧山芹醇当归酸酯，纯度均在96%以上。
2.3.3 儿茶素的纯化
王智聪[27]等利用高压制备液相色谱技术纯化表没食子儿茶素没食子酸酯粗品中的没食子儿茶素没食子酸酯，纯度可以达到99.51%。
林丹[28]等利用反相中压制备液相色谱技术从茶多酚中分离出没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯4种单体，纯度分别为91.8%、97.6%、97.7%、99.3%。
2.4 在蒽醌类成分提取中的应用
2.4.1 在茜草中分离茜草蒽醌
茜草蒽醌是植物茜草的主要有效成分之一，具有抗肿瘤活性作用。林顺权[29]等以茜草为原料，采用中低压制备色谱技术纯化茜草中的茜草蒽醌单体，一共得到4种单体，经鉴定分别为：大叶茜草素、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-（3′,6′-O-二乙酰基-α-鼠李糖（1→2）-β-D葡萄糖苷和1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-新橙皮糖苷，纯度分别为99.87%、99.56%、99.42%、98.21%。
2.4.2 分离大黄中的大黄酚和大黄素甲醚
大黄酚和大黄素甲醚是蒽醌类化合物，是廖科植物大黄的两种有效成分，大黄酚有抗菌、止血、降血糖等作用，大黄素甲醚有抑菌作用。田嘉铭[30]等利用制备型高效液相色谱技术纯化大黄提取物中的大黄酚、大黄素甲醚，以甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）为流动相，流速为20 mL/min，得到产物大黄酚纯度为98.8%，大黄素甲醚纯度为98.7%。
2.5 在生物碱类成分提取中的应用
2.5.1 从岩黄连中分离岩黄连碱
岩黄连是罂粟科紫堇属植物石生黄堇的全草，其有效成分是总生物碱，岩黄连碱是岩黄连总生物碱中的一种，有杀菌、止痛等作用。蒋伟哲[31]等采用制备色谱技术从岩黄连提取液粗品中分离出岩黄连碱单体，产品质量分数在99%以上。
2.5.2 从吴茱萸中分离生物碱
吴茱萸是芸香科吴茱萸属植物，有止痛、抑菌等效果。Renmin Liu[32]等用高速逆流色谱技术从吴茱萸中分离出5种生物碱：吴茱萸碱、芸香萜、吴茱萸新碱、1-甲基-2-[（6Z,9Z）]-6,9-十五碳二烯基-4-（1H）-喹诺酮、1-甲基-2-十二烷基-4-（1H）-喹诺酮，纯度分别为98.7%、98.4%、96.9%、98.0%、97.2%。
2.5.3 从辣椒中分离辣椒碱单体
辣椒是一年生草本茄科植物，其中辣椒碱类化合物有辛辣味。研究表明辣椒碱具有镇痛、杀菌、消炎的作用。艾秀珍[33]等利用反相制备液相色谱技术从辣椒碱类化合物（其中辣椒碱含量60.46%、二氢辣椒碱含量33.35%、降二氢辣椒碱含量4.1%）中分离得到辣椒碱单体，以甲醇-水（75:25）为流动相，流速为4.0 mL/min，得到的辣椒碱单体纯度为95.23%，回收率为93.27%。
2.5.4 在益母草中分离益母草碱
益母草碱是唇形科益母草属植物益母草的生物碱类有效成分，益母草碱具有抗心血管疾病的作用。江敏红[34]等利用高速逆流色谱技术，以乙酸乙酯-正丁醇-水（3:2:5）为溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，流速为2.2 mL/min，从益母草粗提物中分离益母草碱，纯度达到96.2%。
2.5.5 从马比木中分离喜树碱
喜树碱是植物喜树、马比木的一类活性物质，具有抗肿瘤的生理活性作用。罗娅君[35]等利用高速逆流色谱技术，从马比木粗提物中分离制备出3种喜树碱类化合物，分别为10-羟基脱氧喜树碱、10-甲氧基喜树碱、喜树碱，纯度分别为98.3%、99.3%、99.0%。
2.6 在萜类产物提取中的应用
2.6.1 从冬凌草中分离冬凌草甲素
冬凌草甲素是唇形科植物碎米桠的主要活性成分，具有清热、消炎等功效，有较强的抗肿瘤活性作用。冬凌草是一种对映贝壳杉烯二萜类化合物。赵新燕[36]等采用反相制备色谱技术，从冬凌草粗品中分离纯化冬凌草甲素，以甲醇-水（55:45）为流动相，流速为35 mL/min，最终得到的产品冬凌草甲素的纯度可达99%。
2.6.2 纯化银杏叶中的白果内酯和银杏内酯A、B、C
银杏内酯为银杏叶提取物中主要的药效成分之一，属于萜类化合物，主要包括银杏内酯A、B、C和白果内酯。苏静[37]等将萃取吸附纯化的银杏提取物经两次高速逆流色谱分离，得到4种内脂单体：白果内酯和银杏内酯A、B、C，纯度分别为98.3%、98.9%、98.8%、98.4%。
2.6.3 分离杭白菊中的小白菊内酯
小白菊内酯是一种倍半萜烯内酯化合物，具有抗氧化、抗炎等多种药理作用。孙兆林[38]等利用高速逆流色谱技术，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（5:5:6:4）为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，流速为2.0 mL/min，从杭白菊超声提取物中分离杭白菊内酯，纯度在92.8%左右。
2.6.4 从油橄榄叶中分离橄榄苦苷
橄榄苦苷是木犀科木犀属乔木油橄榄中的一类裂环烯醚萜类化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化等作用。王玉[39]等利用高速逆流色谱技术，以正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水-氯仿（1:19:1:19:0.4）为溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，从油橄榄叶中成功分离得到橄榄苦苷，纯度在90%以上。
夏雅俊[40]等利用反相中压制备液相色谱技术，从油橄榄叶中分离出5种多酚类化合物：脱咖啡酰基毛蕊糖苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、6″-O-β-D-吡喃葡萄糖-橄榄苦苷、裂环马钱子苷、橄榄苦苷，纯度均在90%以上。
2.7 在有机酸类成分提取中的应用
2.7.1 在金银花中提取新绿原酸
新绿原酸是忍冬科植物忍冬的花蕾金银花的有效成分之一，具有抗菌解热、抗血栓、抗氧化、抗炎等药理作用。倪付勇[41]等利用中低压制备色谱技术从金银花提取液中分离纯化出新绿原酸单体，以乙腈-0.5%甲酸溶液（10:90）为流动相，流速为20 mL/min，分离制备的新绿原酸纯度达98.86%。
2.7.2 在杜仲和车前子中分离京尼平苷酸
京尼平苷酸是杜仲科杜仲属植物杜仲、车前科植物车前、茜草科植物龙船花的活性成分之一。邹登峰[42]等利用快速制备液相色谱技术，从杜仲皮和车前子的纯化提取液中分离出京尼平苷酸，以甲醇-水-乙酸（40:60:0.5）为流动相，流速为2.5 mL/min，分离出的京尼平苷酸单体纯度可以达到98.69%。
2.8 在其他类产物提取中的应用
2.8.1 生物制品的分离
郭子媛[43]等以对氯苯基氨基甲酸酯化β-环糊键合氨化硅胶作为手性固定相，用半制备高效液相色谱技术成功拆分了含手性半胱氨酸的三螯合型钌苯配合物的非对映异构体，得到了对应度较高的两对非对映异构体。
康丽梅[44]等采用超大孔离子交换制备色谱技术，从人血浆中分离高活性凝血因子Ⅷ（FⅧ），其回收率为85%。
陈婷[45]等采用两步连续离子交换制备色谱技术，分离出几种不同的聚乙二醇与重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）偶联物。
2.8.2 在云杉中制备分离酚类化合物
Rune Slimestad[46]等提出用高速逆流色谱技术从挪威云杉中分离酚类化合物。
2.8.3 在蛹虫草中制备虫草素
虫草素是一种核苷类天然产物，是麦角菌科虫草属植物蛹虫草的主要活性成分之一。胡瑕[47]等利用高速逆流色谱技术，以蛹虫草发酵液虫草素粗提取物为原料分离虫草素，以乙酸乙酯-正丁醇-0.5%氨水（2:3:5）为溶剂体系，上相作为固定相，下相作为流动相，最终分离的虫草素纯度为98.7%。
2.8.4 从牛胆汁中分离牛黄胆酸钠
牛磺胆酸钠是牛胆汁中的一种活性成分，具有镇咳、祛痰等药理作用。杨洋[48]等利用制备型高效液相色谱技术，从牛胆汁中分离牛磺胆酸钠，以甲醇-0.4%磷酸二氢钠水溶液（55:45）为流动相，得到牛磺胆酸钠纯度为98.1%。
2.8.5 对映异构体的拆分
陈韬[49]等以EnantioPakOD填料为手性固定相、正己烷-乙醇（70:30）为流动相，在四区模拟移动床上拆分甲霜灵外消旋体，得到S-（+）-甲霜灵和R-（-）-甲霜灵的光学纯度都大于99%。
3 结语
从动植物等天然的资源中提取具有药效的活性成分研究，开发出新的药品是现代药物研发的一个重要方向。天然产物具有品种繁多、结构复杂、含量低等特点，经过一代代的发展，制备色谱技术作为一种有效的分离手段在天然产物分离提纯中得到了广泛应用。其中，经典的柱色谱技术有处理量大、耗时长的特点，薄层色谱技术有制备简单、处理量小的特点，加压液相色谱技术具有分辨率高但设备复杂的特点，模拟流动床色谱技术能进行连续大量的分离处理，高速逆流色谱技术具有高回收率、高产量等优点。总之，研究者们可以根据需要选择不同类型的制备色谱技术或者将色谱技术与其他分离技术进行组合运用，以实现天然产物活性成分的高效制备与高效分离。
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作者简介：
岳亚文（1995—），女，河南信阳人，硕士研究生
研究方向：
中药的提取与分离
通讯作者：
韩伟（1968—），男，江苏扬州人，博士，教授，从事中药制药工程、药物分离工程的研究工作。
