CSP2017专题发言 | 基底外侧杏仁核介导海洛因成瘾记忆长期戒断后的再巩固更新过程

【目的】探究抑制远期海洛因成瘾记忆的行为学范式以及神经机制。

【方法】利用大鼠海洛因自身给药模型，训练后戒断28天给予非条件性刺激唤起-消退范式，观察其对长期戒断后的海洛因成瘾记忆的影响。采用免疫荧光方法检测戒断28天后非条件性刺激唤起对大鼠不同脑区的激活情况。采用化学遗传学技术（DREADD）抑制和激活基底外侧杏仁核（basolateral amygdala, BLA），探究BLA在唤起-消退范式调控远期成瘾记忆中的作用。利用蛋白免疫印迹和药理学手段进一步研究BLA介导非条件性唤起消退范式的分子机制。

【结果】海洛因自身给药训练后戒断28天进行记忆再巩固更新范式干预，发现与条件性刺激唤起-消退范式相比，非条件性刺激唤起-消退范式可显著抑制海洛因点燃、自发恢复以及环境更新诱导的海洛因觅药行为的复燃，证明该范式对远期海洛因成瘾记忆具有抑制作用。通过免疫荧光方法筛选28天戒断后非条件性刺激唤起的脑区，发现同条件性刺激相比，非条件性刺激显著激活BLA。进一步利用化学遗传学技术DREADD（hM4Di）抑制BLA脑区后，非条件性唤起-消退范式对于远期海洛因成瘾记忆的抑制作用被破坏，证明该脑区在远期海洛因成瘾记忆的再巩固更新过程中是必须的。同时利用DREADD（hM3Dq）激活BLA后给予条件性唤起-消退范式操作，可以有效地抑制远期海洛因成瘾记忆，证明BLA介导远期海洛因成瘾记忆的再巩固更新过程。分子机制的研究方面，我们发现戒断28天后进行非条件性刺激唤起可以降低BLA脑区突触体中GluA1和GluA2的表达水平，而条件性刺激唤起则没有这种作用。BLA脑区微注射GluR23Y阻断AMPA受体内吞可阻断非条件性刺激唤起-消退范式对远期海洛因成瘾记忆的抑制作用，进一步证明了BLA脑区在远期海洛因成瘾记忆的再巩固更新过程中的作用。最后，我们利用美沙酮替代海洛因进行非条件性刺激唤起，发现美沙酮唤起-消退范式同样可以抑制远期海洛因成瘾记忆，证明该范式具有一定的临床转化意义。

【结论】记忆再巩固更新范式中只有非条件性刺激唤起-消退训练范式能破坏远期海洛因成瘾记忆，从而降低药物渴求和防止复吸，条件性刺激唤起-消退范式没有这种作用。BLA脑区介导了非条件性刺激唤起-消退范式对远期海洛因成瘾记忆的抑制作用，且AMPA受体内吞在其中起着非常重要的作用。