科普 | 菌种保藏的常见方法

一、菌种

菌种是用于发酵过程作为活细胞催化剂的微生物，主要包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类。它来源于自然界大量的微生物，从中经分离并筛选出有用菌种，再加以改良，贮存待用于生产。 

二、菌种保藏的基本原理及意义

菌种是所有微生物发酵制品的源头，会直接影响目的产物的好坏，因此菌种保藏就显得格外重要。 

目前菌种保藏的方法有很多种，其原理大多大同小异，主要采用一些物理或化学方法使微生物的生命活动处于半永久性的休眠状态，使微生物的新陈代谢作用限制在最低范围内。

菌种是国家的一种重要资源，保持优良菌种的优良性能，可保证高产稳产；在基础研究中，菌种保藏可保证研究结果获得良好的重复性。

三、菌种保藏的常见方法

1、斜面传代保藏法

此法是把菌种接种到所需要的斜面培养基上，在最适温度下培养，长出丰满的菌体细胞或孢子后，置于4℃冰箱或冷库保藏。此法方法简单，存活率高，适用于各类菌株的保藏。但保藏时间不长，需定期传代，传代过程中易退化污染，只适用于短期保藏。

2、甘油管冷冻保藏法

甘油管保藏法是将富集培养后的菌液与已灭好的甘油充分混合，使终浓度控制在20-30%之间，分装至甘油管中，最后置于-70℃冰箱或液氮罐保藏。此法相比斜面传代保藏时间更长，温度越低，保藏时间越久。

3、液体石蜡保藏法

液体石蜡保藏是在斜面培养或穿刺培养上加一层液体石蜡，液体石蜡可以防止失水干燥，隔绝空气，降低菌种细胞代谢速率。此法更适用于细菌和酵母菌。

4、沙土管保藏法

沙土管保藏法是把微生物附着在砂质载体上，目的是为了将微生物赖以生存的水分蒸发掉，使细胞处于休眠和代谢停滞状态，从而达到较长保藏的目的。此法适用于霉菌和放线菌。

5、真空冷冻干燥保藏法

该法集中了菌种保藏中低温、缺氧、干燥和添加保护剂等多种有利条件，使微生物的代谢处于相对静止状态。同时该法可用于细菌、放线菌、丝状真菌、酵母菌及病毒的保藏。因而具有保藏菌种范围广、时间长（10-20年）、存活率高等特点，是目前最有效的菌株保藏方法之一。